双荧光素酶报告基因检测发布日期:2021-05-06 浏览次数:

近几年来,以基因工程为基础的报道基因技术逐渐成为最具发展潜力的基因分析工具之一。当今发展起来的众多报告基因中,荧光素酶报告基因因其具有快速、灵敏度高、线性范围广等优点,在大多数哺乳动物细胞中不存在内源性表达而受到人们的青睐。

在双荧光素酶报告基因检测方面,普健生物具有长期的实验分析经验,帮助您合理设计实验。采用高效转染剂、高灵敏度荧光素酶检测试剂盒,保证检测结果可靠。为客户提供详尽的原始数据和实验报告等技术服务。

报告性基因:编码可用于检测的酶和蛋白的基因,是现代分子生物学研究领域用来分析基因转录和调节的方便工具,可以用来分析结构基因旁侧区域的潜在顺式元件(如启动子、增强子、沉默子等)和反式作用因子之间的相互作用。

启动子是一个在真核基因转录起始位点上游的具有不同长度的特异性序列,它具有结合位点的多个调节因子,能够顺式地调节基因的转录,从而间接地定量测定启动子的活化程度,从而定量描述蛋白质(如Ⅰ型干扰素)的表达。

汇报基因的条件:

在没有宿主细胞干预的情况下编码产物的活性;

代码产物在宿主细胞内不存在,易于区分;

对编码产物进行活性测定,需要快速、简便、灵敏度高和重现性好。

通用报告基因:氯霉素乙酰转移酶基因(CAT),β-gal,荧光素酶基因(Luc)

报道基因的应用:研究启动子作用,细胞信号传导,基因转录调节,作为分子标记,生物大分子间相互作用,RNA干扰研究,影像学技术,药物筛选。

报告基因系统的双荧光素酶。

用萤火虫荧光素酶(FireflyLuciferase)和海肾荧光素酶(RellinaLuciferase)组成的两种荧光素酶报告基因实验系统(Dual-LuciferaseReporterAssay)构成的两种荧光素酶报告基因,能够更好地反映其结果的准确性。萤火虫荧光素酶在实验中与特定的基因表达实验条件有关,海肾荧光素酶用于制作转染内参,以校正不同样品间转染的效率。不需要翻译后修饰,萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶就具有生物活性,一旦翻译完成,报告基因就发挥作用。添加特定的荧光素酶基质,使荧光素酶与基质反应时产生生物荧光,再用荧光测定仪测定反应时产生的生物荧光。

同CAT,β-Gal,GUS等传统的共报告基因相比,双荧光素酶报告基因系统更敏感,并有希望将可能削弱实验准确度的内在因素的变化降到最小(例如,培养细胞的数量和健康状况的差异,细胞的转染和裂解效率的差异,等等),并且报告基因的检测非常快速(30s内完成测试),简单方便。

荧光素双酶报告基因检测服务

顺序分析

关联载体亚克隆

对转录因子和基因质粒进行共转染的细胞培养。

萤光素酶活性测定

试验报告

双层荧光素酶报告基因检测设计图解及示意图:

双荧光素酶报告基因检测(图1)

顾客提交样品要求:

用户可提供构造良好的含有目标调节元件的报告基因质粒,以及所有与之相关的信息。同时,本中心还可将目标调节因子序列及其相关信息克隆到相应的报告基因质粒中。